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熒光顯微鏡是對(duì)熒光細(xì)胞進(jìn)行定性和定量研究的工具之一
點(diǎn)擊次數(shù):1059 更新時(shí)間:2021-12-30
熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。熒光顯微鏡利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
熒光顯微鏡使用注意事項(xiàng):
1、嚴(yán)格按照熒光顯微鏡說(shuō)明書要求進(jìn)行操作,不要隨意改變程序。
2、熒光顯微鏡應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后,接上電源,點(diǎn)燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后,眼睛*適應(yīng)暗室,再開始觀察標(biāo)本。
3、防止紫外線對(duì)眼睛的損害,在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。
4、檢查時(shí)間每次以1~2h為宜,超過(guò)90min,超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,Z多不得超過(guò)2~3h。
5、熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時(shí)間,保護(hù)光源。天熱時(shí),應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí),須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。
6、標(biāo)本染色后立即觀察,因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中保存,可延緩熒光減弱時(shí)間,防止封裱劑蒸發(fā)。
7、熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn):一般分為四級(jí),即“-"表示無(wú)或可見(jiàn)微弱熒光。“+"表示僅能見(jiàn)明確可見(jiàn)的熒光?!?+"表示可見(jiàn)有明亮的熒光?!?++"表示可見(jiàn)耀眼的熒光。